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美国红枫组培快繁新方法

发布者:admin   发布日期:2017/6/5   点击次数:3309

组织培养是指在无菌条件下利用人工培养基对植物组织进行培养,是生物工程研究的基础,是进行遗传转化和植物改良研究的基本环节。美国红枫的组织培养快速繁殖方法通过一系列的灭菌过程后,对美国红枫茎段进行离体培养,利用激素调控,建立起美国红枫的快速繁殖体系,成功地培养出完整的生根的再生植株,移栽成活率达到90%,该方法虽克服了美国红枫常规育苗周期长,扦插繁殖系数低等缺点,实现了美国红枫的工厂化生产,但该方法以NN69为基本培养基,培养基中还需添加激素KT-30,增加生产成本,且外植体要经过启动培养、继代培养、生根培养,生产周期较长,仍不利于工厂化生产。

美国红枫

美国红枫组培快繁新方法,它包括以下步骤:

切取外植体:采集无病害的美国红枫幼嫩茎段,切割成3cm长的茎段,于流水中冲洗1Omin后,吸干水分;

灭菌:将冲洗后的外植体放入超净工作台,用浓度为70%的酒精消毒18s,用无菌水冲洗5次,再放入浓度为0.1%的升汞中灭菌7min,用无菌水冲洗6次,置于无菌纸上晾干;

启动培养:将灭菌后的外植体接种于启动培养基中培养,其中,启动培养基为WPM+GA3 0.1mg/L+TDZ 0.05 mg/L+ 蔗糖 30g/L+ 琼脂 5g/L,pH 为 6,培养条件为:光照强度3200LX,光照时间18h,温度23℃,培养时间16d,经启动培养后腋芽伸长3cm ;

生根培养:选取经启动培养后茎长为2cm的美国红枫带芽茎段,将腋芽切下后转移至生根培养基中进行培养,其中,生根培养基为1/2WPM+NAA 0.05mg/L+蔗糖25g/L+琼脂5g/L,pH为6.5,培养条件为:光照强度3000LX,光照时间14h,温度24℃,培养时间21d,经生根培养后,美国红枫生长4cm,生根数为4,根长5cm。

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